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10.3760/cma.j.cn311962-20220107-00001

两种核酸扩增检测方法用于病毒载体制品支原体检测的比较

引用
目的:研究两种支原体快速检测方法在病毒载体制品中的适用性和影响因素。方法:采用基于PCR技术的两种支原体核酸扩增检测方法,对分别表达Ⅱ型单纯疱疹病毒抗原gD和ICP27的重组仙台病毒载体疫苗(SeV-dF/HSV-2 gD、SeV-dF/HSV-2 ICP27)收获液及纯化液进行支原体检测,探究其特异性和最低检测限,并对多个批次的收获液及纯化液进行测定。结果:普通PCR法在对本制品病毒收获液检测时无明显PCR抑制现象,但对病毒纯化液检测时发生明显的PCR抑制,并且未能检出100 CFU/ml限度的口腔支原体和肺炎支原体。实时荧光定量PCR法在对本制品病毒收获液和纯化液的支原体检测中均无PCR抑制发生,且该方法对口腔支原体、肺炎支原体等多种支原体的检测灵敏度可达到10 CFU/ml,其中对口腔和肺炎支原体核酸拷贝数检测灵敏度可达到每毫升50基因组拷贝。结论:实时荧光定量PCR法具有更高特异性和灵敏性,适用于作为质量内控方法快速检测病毒载体制品,及时发现支原体的污染,保证制品质量。

支原体、核酸扩增法、重组病毒载体制品

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Q93(微生物学)

国家科技重大专项"重大新药创制"2013ZX09402302-224;National Science and Technology Major Project of China for "Major New Drug Innovation and Development"2013ZX09402302-224

2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共7页

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国际生物制品学杂志

1673-4211

31-1962/R

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2022,45(4)

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