抗柯萨奇病毒A组2型单克隆抗体制备及ELISA抗原检测方法的建立

摘要：

目的:制备抗柯萨奇病毒A组2型(coxsackievirus A2，CV-A2)单克隆抗体(单抗)，建立CV-A2抗原检测方法。方法:用纯化后的CV-A2全病毒颗粒免疫小鼠，筛选获得抗CV-A2单抗。建立CV-A2抗原检测方法，确定线性范围，对其准确度、精密度、稳定性、专属性进行验证。用ELISA检测病毒颗粒纯化过程中样品的抗原含量。结果:制备了高效价的抗CV-A2单抗并建立ELISA抗原检测方法，检测范围为5.00~320.00 ng/ml。高、中、低3个浓度样品准确度验证回收率在89.58%~104.78%之间。重复性验证变异系数分别为2.10%、2.47%、6.18%。中间精密度验证变异系数分别为2.89%、2.69%、1.94%。耐用性验证回收率在84.26%~114.21%之间。包被微孔板于37 ℃放置3 d，样品回收率在90.31%~103.11%之间。专属性验证结果显示该方法只识别CV-A2抗原，与其他抗原均无交叉反应。结论:建立并验证了CV-A2 ELISA抗原检测方法，可应用于病毒纯化过程中样品的抗原检测，还可应用于含CV-A2的手足口病多价疫苗的CV-A2抗原含量检测。

关键词：柯萨奇病毒、抗体，单克隆、双抗体夹心酶联免疫吸附测定、抗原

所属期刊栏目：45

分类号：R392.11

资助基金：国家科技重大专项"重大新药创制"2015ZX09102021;2017湖北省技术创新专项2017ACA078;National Science and Technology Major Project of China for "Major New Drug Innovation and Development"2015ZX09102021;2017 Hubei Provincial Technical Innovation Special Project2017ACA078

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：90-96