新型冠状病毒核衣壳蛋白在卡介苗中的表达及鉴定

摘要：

目的:构建并鉴定表达新型冠状病毒核衣壳(nucleocapsid，N)蛋白的基因重组BCG。方法:利用PCR技术从质粒pUC57-N(Kan
+抗性)中获得新型冠状病毒N蛋白全长基因。将
N基因连接到大肠埃希菌-BCG穿梭表达质粒pMV261，进行酶切、PCR及测序鉴定。重组质粒经电转化导入感受态BCG，通过蛋白印迹法鉴定目的基因在重组BCG中的表达。
结果:经过PCR扩增获得1 260 bp的
N基因，构建的重组表达质粒pMV261-N序列完整，插入的基因片段与美国国家分子生物学信息资源中心报道的新型冠状病毒N蛋白全长基因的大小及序列一致。重组质粒能够在BCG中表达相对分子质量约为46 000的目的蛋白，蛋白印迹法显示该蛋白能被抗新型冠状病毒N蛋白单克隆抗体识别。
结论:构建的重组BCG能稳定表达新型冠状病毒N蛋白，为开发新型冠状病毒
N基因重组BCG疫苗奠定了基础。

关键词：新型冠状病毒、卡介苗、核衣壳蛋白

所属期刊栏目：45

分类号：R373.2+ 1(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：山东省重点研发计划项目2018GSF118137;山东省医药卫生科技发展计划项目2017WS339;山东省高等学校科技计划项目J17KB085;济宁市重点研发计划项目2019SMNS020;济宁医学院重点项目16008;贺林院士工作站重点项目JYHL2019ZD03;济宁医学院大学生创新创业项目CX2019102;Key R&D Programme of Shandong Province2018GSF118137;Medical and Health Technology Development Plan Project of Shandong Province2017WS339;Project of Shandong Province Higher Educational Science and Technology ProgramJ17KB085;Key R&D Programme of Jining City2019SMNS020;Key Project of Jining Medical University16008;Research Fund for Lin He’s Academician Workstation of New Medical and Clinical TranslationJYHL2019ZD03;College Students’ Innovation and Entrepreneurship Project of Jining Medical UniversityCX2019102

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：18-22