靶向CD19嵌合抗原受体T细胞体外构建、扩增及抗肿瘤活性研究

摘要：

目的:探索特异性靶向CD19的嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor, CAR)T细胞的构建与制备方法，并研究其体外杀伤靶细胞的效果。方法:通过基因合成和分子克隆手段构建靶向CD19-CAR片段并将其插入pLenti6.3慢病毒载体，利用293FT悬浮细胞系包装慢病毒并转染人外周血单个核细胞来源的CD3
＋ T细胞。通过流式细胞术鉴定转染效率，并通过实时无标记细胞分析法和细胞计数试剂盒8检测靶向CD19-CAR-T细胞体外杀伤效果。
结果:获得了表达抗CD19的单链抗体基因的慢病毒，病毒滴度可达3.2×10
8噬斑形成单位/ml。经慢病毒转染的CD3
＋ T细胞在体外培养14 d后，细胞扩增效率达(60.2±11.5)倍，靶向CD19-CAR-T细胞阳性率达90.57%。经检测，靶向CD19-CAR-T细胞均可有效杀伤CD19
＋靶细胞。
结论:建立了基于无血清悬浮细胞系的靶向CD19-CAR慢病毒包装系统，成功构建靶向CD19的CAR-T细胞，该细胞能特异性杀伤CD19
＋肿瘤细胞。

关键词：CD19、嵌合抗原受体T细胞、慢病毒属、免疫疗法

所属期刊栏目：43

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：224-228