人C1酯酶抑制剂初步纯化过程pH值和聚乙二醇含量的优化

摘要：

目的:探讨pH值、聚乙二醇(polyethylene glycol，PEG)含量和离心条件对PEG4000粉末用于去除人C1酯酶抑制剂(C1 esterase inhibitor，C1-INH)制备原料中的IgM效果的影响，并通过对羧甲基(carboxymethyl，CM)离子交换层析中洗脱盐离子浓度的筛选，分离活性与非活性C1-INH。方法:向不同pH值的C1-INH制备原料中加入不同质量分数的PEG4000，于不同条件下离心后，用特定蛋白检测仪对离心后上清液中IgM和C1-INH含量进行检测，确定PEG沉淀法纯化C1-INH的最佳条件。将离心后上清液调节pH后作为CM离子交换层析上样样品，使用不同盐离子浓度的洗脱液对活性C1-INH进行分离，确定最佳的盐离子浓度。结果:在弱酸性pH(6.8)下，当PEG4000质量分数为12%，离心条件15 000×
g、25 ℃、20 min时，IgM去除率>99%，且C1-INH的回收率>80%；在盐离子浓度为200 mmol/L时，产物中C1-INH的比活性最大(4.43 IU/mg)，且绝大多数杂质蛋白得以去除。
结论:优化条件下，PEG4000能有效去除C1-INH制备原料中的IgM，且能保持较高的C1-INH回收率；CM离子交换层析能对活性与非活性C1-INH进行有效分离，并去除大多数杂质蛋白。

关键词：聚乙烯二醇类、pH值、离心法、色谱法，离子交换、羧甲基纤维素钠、人C1酯酶抑制剂

所属期刊栏目：43

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：126-131