不同培养基和胰蛋白酶对Vero细胞培养及消化效果的比较

摘要：

目的:比较不同公司生产的无血清培养基对病毒性疫苗生产用Vero细胞培养效果，及基因工程胰蛋白酶的细胞消化效果，以判断是否适用。方法:实验组用VirusPro Vero-A培养基进行Vero细胞的培养，用Trpzyme消化细胞。对照组用VP-SFM培养基进行细胞培养，用TrypLE Select消化细胞。两组Vero细胞以相同密度接种在T175培养瓶中，以相同的培养条件和传代方法在T175瓶和细胞工厂中各培养3代。培养期间观察细胞的上清液、形态以及汇合度，消化后检测细胞活率并计算细胞收获量。采用配对
t检验比较两组消化液的pH值、总消化时长、37 ℃消化孵育时长、细胞活率以及细胞收获量。
结果:两组细胞生长状态均良好。配对
t检验显示，实验组消化液的pH值(6.99)、总消化时长(17.28 min)和37 ℃消化孵育时长(6.93 min)均值均大于对照组消化液(分别为6.75、12.34 min、3.30 min)，细胞活率(94.79%)及细胞收获量(T175瓶：3.91×10
7个；细胞工厂：1.90×10
9个)均值均高于对照组的(分别为90.20%、3.33×10
7个、1.26×10
9个)，且差异有统计学意义(
t值分别为9.17、3.46、2.98、2.31和4.38，
P值均<0.05)。
结论:实验组无血清培养基培养效果较好，实验组基因工程胰蛋白酶细胞消化液温和、细胞损伤小，均适用于Vero细胞。

关键词：细胞培养技术、Vero细胞、培养基，无血清、胰蛋白酶

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资助基金：湖北省技术创新专项（重大项目）2018ACA120;Special Technology Innovation Program of Hubei Province Major Program2018ACA120

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：116-119