乙型脑炎减毒活疫苗病毒滴定用BHK21细胞密度和代次的确认

摘要：

目的 确定乙型脑炎(乙脑)减毒活疫苗病毒滴定使用的BHK21细胞的密度和代次范围.方法 抽取20批不同代次BHK21细胞在6孔细胞板内培养成单层,进行细胞计数,计算细胞密度,滴定同批次乙脑病毒滴度国家参考品.将BHK21细胞从P95传代至P105,观察细胞形态及生长情况,与已用于检定的BHK21细胞(<P95)对比.用P95—P105 BHK21细胞重复6次滴定同批参考品,对滴度结果进行双因素方差分析,并与<P95 BHK21细胞的病毒滴度检测结果进行趋势分析比较.结果 20批6孔板单层BHK21细胞密度均值1.55×106个/ml,差异较大(95％ 置信区间:7.89×104～3.02×106个/ml).病毒滴度结果均在规定范围内(6.48～7.12lg蚀斑形成单位/ml,相对标准偏差<5％),单层细胞密度对滴度结果无显著影响.P95—P105 BHK21细胞的生长情况及细胞形态与<P95基本一致,病毒滴定结果均在规定范围内.不同试验次数(F=0.13,P=0.7214)、不同细胞代次(F=1.17,P=0.3376)及两者的交互作用(F=0.30,P=0.9780)对检测结果的影响无统计学意义,试验结果与较低代次细胞(<P95)检测的结果趋势一致,均整体稳定.结论 BHK21细胞可连续传代至P105用于乙脑减毒活疫苗病毒滴定,且单层BHK21细胞密度对滴度检测结果无显著影响.

关键词：日本脑炎疫苗、BHK21细胞、细胞密度、细胞代次、病毒滴定

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在线出版日期：2019-01-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：270-274