细菌表面展示纳米级白蛋白的实验研究

摘要：

目的 建立细菌表面展示纳米级白蛋白的体系.方法 将球形芽孢杆菌表面层蛋白编码基因sllB的3 ′端截短后与人血清白蛋白(human serum albumin,HSA)编码基因融合,5′端与链霉抗生物素蛋白(Strep-tagI)的编码基因连接,置于大肠杆菌中表达.用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹法验证蛋白表达结果,并在透射电镜下测量表达产物的粒径.结果 将合成的Strep-tagI/sllB1-2706 bp/Gly4Ser/HSA融合基因片段测序验证后插入原核表达质粒pET28a(+).转化宿主菌E.coli BL21诱导表达后,全蛋白和不溶性蛋白样品经SDS-PAGE鉴定,在相对分子质量约166 000处出现特异性条带,蛋白质印迹法表明重组蛋白可与抗His-Tag单克隆抗体结合.透射电镜下可见BL21表面有大量品格结构,平均粒径142.3 nm.结论 将球形芽孢杆菌表面层蛋白编码基因与HSA编码基因融合后进行原核表达获得了纳米级白蛋白,为采用基因工程方法生产纳米药物和疫苗提供了一条新途径.

关键词：膜蛋白质类、血清白蛋白、芽孢杆菌属

所属期刊栏目：34

分类号：R97(药品)

在线出版日期：2012-03-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：293-296