10.3760/cma.j.issn.1673-4211.2011.04.003
血管内皮生长因子定量检测试剂盒的研制
目的 研制血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)检测试剂盒(酶标法).方法 以一株特异性抗VEGF单克隆抗体作为捕获抗体,另一株单克隆抗体作为检测抗体,通过棋盘滴定法确定两抗体的最佳浓度组合.制备冻干VEGF165参考品,并对样本稀释液、封闭液等实验条件进行优化.检测自制试剂盒的特异性并对其进行初步应用.结果 棋盘滴定法确定捕获抗体的质量浓度为10μg/ml,检测抗体的稀释倍数为1:20 000.冻干VEGF165的质量浓度为720~880 pg/ml,样本间变异系数<10%.以5%牛血清白蛋白作为封闭液和样本稀释液最为合适.自制试剂盒与10种细胞因子均无交叉反应,具有较高的特异性和灵敏度.结论 成功研制出VEGF检测试剂盒.
血管内皮生长因子类、试剂盒、抗体、单克隆
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R318(医用一般科学)
北京市科委计划项目Z07000200540703;北京市海淀区科技项目K2008102
2011-09-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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