检测大肠杆菌菌体蛋白的夹心ELISA试剂盒的建立及应用研究

摘要：

目的 建立特异、敏感的检测大肠杆菌菌体蛋白的夹心ELISA试剂盒.方法 采用大肠杆菌菌体蛋白免疫家兔,制备得到高效价抗菌体蛋白抗血清.将经饱和硫酸铵盐析、阴离子交换层析和亲和层析纯化的兔抗大肠杆菌菌体蛋白特异性多克隆抗体作为包被抗体和检测抗体,用生物素标记检测抗体,并加入辣根过氧化物酶标记的亲和素.结果 建立的大肠杆菌菌体蛋白夹心ELISA检测方法的敏感性为0.32 μg/L,检测范围为1～100 μg/L,与国际同类商品化试剂盒相当.此法具有良好的稳定性,其批内变异系数小于7.7%,批间变异系数小于6.2%.结论 建立了特异、敏感、稳定的检测大肠杆菌菌体蛋白的夹心ELISA试剂盒,为生物制品中残留大肠杆菌菌体蛋白的质量控制提供了一种重要的检测方法.

关键词：大肠杆菌、酶联免疫吸附测定、蛋白质、多克隆抗体

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分类号：R5(内科学)

资助基金：国家科技支撑计划项目2006BAF07B01

在线出版日期：2010-01-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：281-284