重组人乳头瘤病毒16型L1 VLP的初步纯化、鉴定及免疫效果的初步研究

摘要：

目的 对昆虫细胞-杆状病毒系统表达的人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型L1蛋白病毒样颗粒(virus-like particle,VLP)进行初步纯化研究,并在小鼠中检测纯化VLP的免疫原性.方法 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化方法纯化HPV16 LI VLP.对纯化得到的VLP分别进行蛋白印迹法、十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及电镜鉴定.然后用VLP免疫6周龄BALB/c小鼠.将小鼠随机分成6组(3个剂量组、2个佐剂组和1个对照组),间隔2周免疫3次,3次剂量相同.取血分离血清,采用间接ELISA法检测抗HPV16 L1 VLP抗体滴度.结果 经蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化后,用SDS-PAGE鉴定纯化的HPV16 LI VLP,纯度达到90%.电镜观察可见完整的VLP颗粒.间接EUSA检测结果显示,剂量组及佐剂组小鼠血清中均可检测到特异性抗HPV16 L1 VLP抗体,且抗体滴度随针次和剂量的增加而增高.结论 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化法得到的HPV16 L1 VLP可用于免疫学初步研究.通过昆虫细胞表达产生的HPV16 LI VLP 具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生强的体液免疫应答.

关键词：人乳头瘤病毒16、L1蛋白、病毒样颗粒、纯化、免疫原性

所属期刊栏目：33

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家高技术研究发展计划项目2007AA02Z475

在线出版日期：2010-08-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：169-172