PINK1通过细胞自噬抑制骨肉瘤细胞增殖的分子机制研究

摘要：

目的 骨肉瘤是青少年和青年人最常见的骨恶性肿瘤之一.虽然对于骨肉瘤的治疗方法有很多,但是其5年生存率仍然很低.PTEN诱导激酶1(PTEN-induced kinase 1,PINK1)是一个帕金森病相关的基因,最初是在癌细胞中发现的.然而,PINK1对于骨肉瘤增殖的作用鲜有报道.方法 利用实时定量PCR和蛋白免疫印迹检测了10例骨肉瘤组织中PINK1的表达.通过抑制PINK1在骨肉瘤细胞系Saos2中表达后,检测了细胞活性和增殖能力的改变;通过蛋白免疫印记检测了自噬相关LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、Beclin-1蛋白以及凋亡相关蛋白Bax、Bad、caspase-3蛋白的变化;利用透射电镜观察自噬小体的形成.结果 与癌旁组织相比,骨肉瘤组织中PINK1的mRNA和蛋白水平均明显升高.此外,CCK-8法和克隆形成实验表明沉默PINK1能够降低SaOS2骨肉瘤细胞生长效率.Ki-67免疫荧光染色显示沉默PINK1后Saos2细胞增殖能力下降.此外,本研究发现,沉默PINK1导致cleaved caspase-3、Bax、Bad相对于对照组表达升高.沉默PINK1提高LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比例,诱导Beclin-1的表达.透射电镜结果 发现沉默PINK1促进自噬小体的形成.结论 PINK1在骨肉瘤中高表达,沉默PINK1能够发挥促凋亡抑增殖的作用,促进自噬的发生.

关键词：骨肉瘤、PINK1、细胞增殖、自噬

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在线出版日期：2019-04-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：341-347