10.3760/cma.j.issn.1673-4386.2013.05.001
简并寡核苷酸引物PCR在荧光原位杂交检测染色体微缺失综合征中的应用
目的 优化荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)所需探针的制备工作,应用FISH检测染色体7q1 1.2、15q11.2以及22q1 1.2缺失.方法 采用简并寡核苷酸引物聚合酶链式反应(degenerate oligonucleotide primed PCR,DOP-PCR)的方法,扩增人工细菌染色体(bacterial artificial chromosome,BAC) DNA,通过切口平移对扩增的DNA进行间接标记,使用制备好的探针检测染色体微缺失.结果 DOP-PCR方法得到的BAC-DNA扩增产物,经标记后用于FISH,可以观察到清晰且背景低的信号;FISH结果确认了1例染色体7q11.2微缺失嵌合体、1例染色体15q11.2缺失.结论 经过优化的实验方法能够快速制备探针,节约抽提BAC-DNA所需的时间,可以应用于FISH以检测微缺失综合征.
简并寡核苷酸引物聚合酶链反应、荧光原位杂交、微缺失综合征、嵌合体
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Q789;R74;R446.62
国家自然科学基金81270426
2014-03-19(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共7页
185-190,195