人突变TDP-43转基因小鼠ALS模型的建立

摘要：

目的 构建带有脊髓运动神经元特异性启动子HB9的人类TDP-43野生型和突变型的转基因小鼠模型,研究TDP-43突变导致肌萎缩侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)的机制.方法 构建pHB9 - hTDP -43Q331K,M337v - IRES- EGFP转基因的载体,通过受精卵原核注射的方法制备转基因小鼠.出生的后代利用PCR方法鉴定.免疫组织化学法观察转基因小鼠的脊髓运动神经元中TDP-43的定位及包涵体的形成.采用步态评估和悬挂实验观察转基因小鼠行为学的改变.结果 获得人TDP-43突变转基因小鼠,其运动神经元胞质中TDP-43染色阳性,未见TDP-43包涵体.小鼠行为学检测显示,转基因小鼠的步距与同龄正常小鼠相比明显下降(Q331K型小鼠同Ntg相比前后肢步距t值分别为6.05和5.15,M337V型小鼠同Ntg相比前后肢步距t值分别为10.71和9.91；P＜0.01)；步态宽度升高(Q331K型小鼠同Ntg相比前后肢步态宽度t值分别为-11.35和-2.73;M337V型小鼠同Ntg相比后肢步态宽度t=2.49;P＜0.05)；平衡抓握力明显下降(Q331K型小鼠同Ntg相比落地时间t=47.43；M337V型小鼠同Ntg相比落地时间t=26.35,P＜0.01).结论 利用HB9启动子可以获得在脊髓运动神经元特异性表达人TDP-43突变的转基因小鼠,TDP-43突变转基因小鼠运动神经元发生退行性改变.转基因小鼠前后肢步距、步态宽度及平衡抓握能力发生改变,结果显示脊髓运动神经元中过表达人TDP-43突变对小鼠的运动能力产生影响.

关键词：肌萎缩侧索硬化症、TDP-43、转基因小鼠

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分类号：R329.23(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金30900413;31000645;中国博士后科学基金20100481020;中国博士后特别资助基金201104421

在线出版日期：2012-08-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：139-145