重组P16蛋白在大肠杆菌中的表达纯化及其功能研究

摘要：

目的 在原核细胞中表达P16蛋白并纯化,研究外源性P16蛋白对肿瘤细胞周期的影响.方法 构建外源性P16融合蛋白的原核表达载体pQE31-p16.IPTG诱导大肠杆菌BL21菌株表达P16融合蛋白,通过亲和层析柱纯化目的 蛋白,经Western-blot鉴定后,将P16蛋白转导入人肺腺癌细胞系A549中,利用免疫细胞化学方法对蛋白进行细胞内定位,同时绘制细胞生长曲线,并用流式细胞仪分析细胞周期的变化.结果 所构建P16融合蛋自的原核表达载体pQE31-p16,可在大肠杆菌中稳定表达,通过纯化获得P16融合蛋白.利用lipofectamine TM2000转染试剂可将P16蛋白转入A549细胞中,生长曲线与流式细胞术结果显示P16蛋白可抑制肿瘤细胞增殖.结论 原核细胞表达的P16蛋白经纯化,转导进入A549细胞,可影响其生长周期,抑制A549细胞的增殖.

关键词：P16、融合蛋白、细胞周期

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分类号：R3(基础医学)

资助基金：高等学校博士学科点专项科研项目20040226001;黑龙江省科学技术计划;黑龙江省教育厅振兴老工业基地重大科技项目;黑龙江省教育厅与卫生厅科研项目;黑龙江省生物医药工程重点实验室开放课题

在线出版日期：2008-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：88-91,161