慢病毒介导的shRNA对大鼠脑纹状体GCDH蛋白的沉默效应研究

摘要：

目的：利用已成功构建的慢病毒载体，检测慢病毒介导的GCDH基因沉默对大鼠脑纹状体GCDH蛋白表达下调的能力。方法：30只健康雄性刚断乳3~4周SD大鼠随机分为绿色荧光蛋白（GFP）对照病毒注射组（对照组）和GCDH慢病毒注射组（GCDH组）各15只。各组分别在脑立体定位仪下定位纹状体组织后单侧给予GFP对照病毒2μL和GCDH慢病毒原液2μL。注射后14 d及1、3月，分别处死大鼠，并取注射区域的脑纹状体组织蛋白质通过Western blot及石蜡切片免疫组化法检测大鼠纹状体GCDH蛋白表达水平，同时测定肝肾功能、血清有机酸及Rotarod行为学。结果：GCDH慢病毒注射14 d及1、3月后，GCDH组可检测到注射区域GCDH蛋白在脑纹状体区域表达有明显降低，同对照组比较差异有统计学意义(<0.05)，2组肝肾功能、血清有机酸及行为学未发现明显差异。结论：成功注射GCDH慢病毒到刚断乳3~4周SD大鼠脑纹状体，并在注射后不同时间均检测到GCDH蛋白的表达稳定下调。

关键词：GCDH、慢病毒载体、脑立体定位注射、纹状体

分类号：R741;R741.02(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金No.81070699；科技部国家十二五科技支撑计划项目2012BAI09B04

在线出版日期：2014-04-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：6-10