大鼠脑源性神经营养因子的克隆及原核重组表达载体的构建

摘要：

目的：构建重组表达载体pGEX-脑源性神经营养因子（BDNF），探讨其原核表达BDNF的可行性。方法：大鼠BDNF进行密码子优化，人工合成BDNF的全基因序列，经回收、纯化、酶切后连接到pGEX原核表达载体中，将重组质粒pGEX-BDNF转化大肠杆菌BL21细胞中，筛选阳性克隆，经IPTG诱导表达后，利用ELISA方法鉴定其表达的活性。结果：PCR鉴定及测序显示BDNF序列完全正确，BDNF基因的克隆和表达载体构建成功，IPTG诱导表达目的蛋白经ELISA检测，其表达的目的蛋白具有一定的活性。结论：经密码子优化后经人工合成得到BDNF基因片段并成功构建pGEX-BDNF重组表达载体，具有一定的生物活性。

关键词：大鼠脑源性神经营养因子、密码子优化、表达载体构建、ELISA检测

分类号：R741;R741.05(神经病学与精神病学)

资助基金：吉林省发改委资助项目JF2012C008-3

在线出版日期：2013-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：407-409