携带人类GAD67基因真核表达载体的构建及转染骨髓基质细胞

摘要：

目的:构建携带人类谷氨酸脱羧酶67(GAD67)基因的真核表达载体pDC316-CMV-EGFP-GAD67,并转染大鼠骨髓基质细胞(BMSCs).方法:利用基因重组技术,构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体;利用脂质体将其转染通过贴壁方法分离培养出来的BMSCs,荧光显微镜下观察并经流式细胞仪检测其转染效率,免疫组化检测GAD67蛋白在BMSCs中的表达.结果:成功构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体,转染BMSCs后荧光显微镜下观察可见绿色荧光细胞,流式细胞仪检测转染后48 h的转染效率为37.3%,免疫组化检测转染后48 h,BMSCs内GAD67蛋白呈阳性表达.结论:构建pDC316-CMV-EGFP-GAD67真核表达载体并成功转染BMSCs.

关键词：谷氨酸脱羧酶67、真核表达载体、转染、骨髓基质细胞

所属期刊栏目：6

分类号：Q782;R742.2(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省科技攻关计划项目GGS0064

在线出版日期：2011-09-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：235-240