HAP1与pro-BDNF胞吞关系的机制研究

摘要：

目的:探讨HAP1与pro-BDNF胞吞的相关性和可能机制. 方法:NGF诱导分化PC12细胞,利用脂质体lipofectamine2000将提取的荧光质粒HAP1A-CFP和(或)pro-BDNF-ds-red转染进入细胞,培养48 h后在含有BDNF、p75NTR或sortilin抗体的DMEM/10%FCS中培养,激光共聚焦显微镜观察荧光的表达情况及其在细胞中的定位;利用培养的小鼠皮质神经元(正常型和HAP1基因敲除型)在生物素标记pro-BDNF的培养基中孵育60 min,激光共聚焦显微镜观察皮质神经元免疫荧光的效果. 结果:共转染HAP1A-CFP和pro-BDNF-ds-red质粒的细胞,以及pro-BDNF-ds-red荧光蛋白培养基孵育的转染HAP1A-CFP质粒的细胞,pro-BDNF与HAP1蛋白的共定位比例高达93%～97%;抗BDNF培养基孵育的共转染2种质粒的细胞,以及pro-BDNF-ds-red荧光蛋白+抗p75NTR/抗sortilin培养基孵育的转染HAP1A-CFP质粒的细胞,2种荧光蛋白的共定位比率下降近一半;pro-BDNF-ds-red荧光蛋白+抗BDNF培养基孵育的转染HAP1A-CFP质粒的细胞几乎未显示2种蛋白的共定位;正常新生小鼠皮质神经元内可见内吞的pro-BDNF免疫荧光,HAP1基因敲除小鼠的皮质神经元内未见. 结论:pro-BDNF的胞吞必需HAP1的表达和参与.

关键词：BDNF前体蛋白、亨廷顿蛋白相关蛋白1、转染、荧光质粒、激光共聚焦显微镜

所属期刊栏目：4

分类号：R741;R741.02(神经病学与精神病学)

在线出版日期：2009-06-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：185-189