10.3760/cma.j.cn511693-20220826-00132
微小RNA-29b通过调控信号转导及转录激活因子3信号通路对多发性骨髓瘤细胞增殖和侵袭的影响
目的:研究微小RNA(miRNA)-29b通过调控信号转导及转录激活因子(STAT)3信号通路对多发性骨髓瘤(MM)细胞增殖和侵袭的影响及其机制。方法:选择人MM细胞系U266、正常浆细胞为研究对象。将对数生长期的U266接种至6孔板,并设置模拟物组(
n=6,加入miRNA-29b模拟物),抑制物组(
n=6,加入miRNA-29b抑制物),阴性对照(NC)组(
n=6,加入miRNA-29b NC物)和空白组(
n=6,不作处理)。采用实时荧光定量(RT)-PCR检测U266和正常浆细胞中miRNA-29b相对表达水平。采用Transwell试剂盒检测细胞侵袭能力,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)试剂盒检测细胞增殖活力,蛋白质印迹法检测细胞中STAT3及其磷酸化STAT3(p-STAT3)蛋白相对表达水平。2组间miRNA-29b相对表达水平的比较,采用独立样本
t检验。多组miRNA-29b相对表达水平、增殖率、侵袭细胞数、STAT3、p-STAT3蛋白相对表达水平的总体比较,采用单因素方差分析;组间两两比较,采用LSD-
t检验。
结果:①空白组U266中miRNA-29b相对表达水平为(1.00±0.10),显著低于正常浆细胞的(4.25±0.41),差异有统计学意义(
t=18.987,
P<0.001)。②模拟物组U266的miRNA-29b相对表达水平较NC组升高[(3.87±0.21)比(0.93±0.09)],抑制物组比NC组下降[(0.34±0.06)比(0.93±0.09)],并且差异均有统计学意义(LSD-
t=39.921、7.975,
P<0.001、0.001),NC组和空白组比较,差异无统计学意义[(0.93±0.09)比(1.00±0.10),LSD-
t=1.084,
P=0.291]。③对于细胞增殖活力,培养24 h时,模拟物组、NC组及抑制物组吸光度值比较,差异无统计学意义(
F=3.722,
P=0.089)。培养48、72 h时,模拟物组吸光度值分别为(0.53±0.05)和(0.91±0.07),较NC组的(0.72±0.06)和(1.23±0.10)显著降低(LSD-
t=3.561、3.982,
P=0.012、0.007),抑制物组分别为(0.90±0.08)和(1.66±0.12),较NC组显著增高(LSD-
t=3.370、5.309,
P=0.015、0.002)。④模拟物组U266侵袭细胞数较NC组显著减少[(23.6±2.1)个比(154.4±7.2)个,LSD-
t=18.428,
P<0.001],而抑制物组较NC组显著增加[(85.2±5.2)个比(154.4±7.2)个,LSD-
t=20.702,
P<0.001]。⑤模拟物组U266中STAT3、p-STAT3蛋白相对表达水平较NC组显著下降[(0.53±0.06)和(0.38±0.05)比(1.26±0.10)和(0.98±0.09),LSD-
t=9.082、8.116,
P<0.001、0.001],抑制物组[(2.92±0.21)和(2.37±0.19)]较NC组显著上升(LSD-
t=20.647、19.081,
P<0.001、0.001),差异均有统计学意义。
结论:MM细胞中miRNA-29b表达水平下调。miRNA-29b过表达可能通过调控STAT3信号通路活性抑制MM细胞的增殖、侵袭能力。
多发性骨髓瘤、微RNAs、STAT3转录因子、细胞增殖、侵袭
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陕西省人民医院科技发展孵化基金项目2021YJY-19;陕西省自然科学基础研究计划项目2012JQ4024;Science and Technology Development Incubation Fund Project of Shaanxi Provincial People′s Hospital2021YJY-19;Natural Science Basic Research Project of Shaanxi Province2012JQ4024
2024-01-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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149-155