10.3760/cma.j.cn121382-20220411-00403
褪黑素通过抑制SOX2的表达减轻缺氧诱导PC12细胞损伤
目的:探讨褪黑素对缺氧诱导PC12细胞损伤的影响及机制。方法:将体外培养的大鼠嗜铬细胞瘤P12细胞分为对照组,缺氧组及缺氧+低、中、高(12.5、25、50 μmol/L)剂量褪黑素组,采用MTT法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫印迹法检测细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved-Caspase-3)和性别决定相关基因簇2(SOX2)蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测细胞中SOX2 mRNA表达,试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。筛选出效果最为显著的高剂量褪黑素组作为缺氧+褪黑素组,然后考察缺氧+褪黑素、缺氧+siRNA-NC、缺氧+siRNA-SOX2、缺氧+褪黑素+pcDNA、缺氧+褪黑素+pcDNA-SOX2分别对细胞活力、细胞凋亡、cleaved-Caspase-3蛋白表达水平、SOX2蛋白和mRNA水平、SOD活性和MDA水平的影响。结果:与对照组比较,缺氧组细胞存活率和SOD活性降低,细胞凋亡率、cleaved-Caspase-3蛋白表达水平、MDA水平和SOX2 mRNA与蛋白表达水平均显著升高(均
P<0.05);低、中、高剂量褪黑素和SOX2低表达均可改善缺氧引起的上述变化(均
P<0.05),而SOX2过表达可减轻褪黑素对缺氧诱导的PC12细胞活力、凋亡和氧化应激的影响(均
P<0.05)。
结论:褪黑素可通过抑制SOX2的表达减轻缺氧诱导PC12细胞损伤。
褪黑素、缺氧、性别决定相关基因簇2、细胞凋亡、氧化应激
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2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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