旁分泌在非小细胞肺癌辐射耐受能力传递中的作用研究

摘要：

目的 通过观察辐射抗性非小细胞肺癌(NSCLC)H460R细胞分泌物对亲本H460细胞辐射敏感性的影响,探讨旁分泌在NSCLC辐射耐受能力传递中的作用及可能机制.方法 将H460细胞接种培养后,分为对照组、条件培养基组、照射组和照射联合条件培养基组.采用137Csγ射线一次性照射,剂量率为1.02 Gy/min.克隆形成实验观察H460R细胞条件培养基对H460细胞辐射敏感性的影响;细胞免疫荧光染色检测磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)阳性细胞百分数;流式细胞仪检测细胞周期变化;蛋白质印迹法(Western Blot)检测DNA损伤修复相关蛋白γH2AX和Rad51的表达.结果 克隆形成实验结果显示,H460R细胞经不同剂量(2、4、6 Gy)的γ射线照射后,再经H460R细胞条件培养基处理,细胞克隆形成数较未处理组(照射组)均明显增加,差异均具有统计学意义(2、4 Gy:均P<0.05;6 Gy:P<0.01).免疫荧光染色结果显示,条件培养基组的γH2AX阳性细胞百分数高于对照组[(39.40±2.51)％比(25.21±2.05)％],差异具有统计学意义(P<0.01);而照射(4 Gy)联合条件培养基组的γH2AX阳性细胞百分数低于照射组[(60.48±2.79)％比(80.65±2.05)％],差异具有统计学意义(P<0.001).流式细胞分析结果显示,照射(4 Gy)联合条件培养基组的G2/M期细胞百分比高于照射组[(26.83±1.42)％比(15.73±1.29)％],差异具有统计学意义(P<0.001).Western Blot检测结果显示,照射(4 Gy)联合条件培养基组的γH2AX蛋白表达低于照射组,而Rad51蛋白表达高于照射组.结论 在肿瘤微环境中,辐射抗性细胞H460R能通过旁分泌增强H460细胞的辐射抗性,这可能与其旁分泌物能阻滞细胞周期和促进DNA修复有关.

关键词：非小细胞肺癌、旁分泌、辐射抗性、DNA修复

所属期刊栏目：41

资助基金：国家自然科学基金31670859,81302803;中国医学科学院"中央级公益性科研院所基本科研业务费"2016ZX310198;中国医学科学院医学与健康科技创新工程项目2017-I2M-1-016;天津市自然科学基金14JCYBJC28800 National Natural Science Foundation of China31670859, 81302803;Central Public-Interest Scientific Institution Basal Research Fund2016ZX310198;CAMS Innovation Fund for Medical Sciences2017-I2M-1-016;Natural Science Foundation of Tianjin14JCYBJC28800

在线出版日期：2018-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：131-137