大鼠EZH2基因过表达质粒以及催化亚基缺失质粒构建及鉴定

摘要：

目的 构建特异性的大鼠EZH2过表达质粒以及EZH2催化亚基SET domain缺失质粒,并在293T细胞中评估其表达水平.方法 提取大鼠心脏组织RNA,逆转录为cDNA,重叠PCR扩增催化亚基SET domain缺失的EZH2的cDNA,以其为模板进行PCR扩增,将PCR产物和载体双酶切,切胶回收目的片段,经T4连接酶连接,连接产物转入感受态细胞,涂板挑取单克隆摇菌测序,提取质粒,采用脂质体转染法转染293T细胞.结果 Western Blot法和RT-PCR法检测结果表明,质粒在293T细胞中实现EZH2基因的过表达.结论 构建的2种质粒为进一步研究EZH2基因与心肌肥厚的关系及EZH2催化亚基的作用奠定了基础.

关键词：EZH2、催化亚基、重组质粒、心肌肥厚

所属期刊栏目：39

分类号：R730.21;S565.1;TS201.21

在线出版日期：2017-03-13（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：326-331