AngⅡ诱导大鼠BMSCs联合脱细胞牛心包体外构建工程化心肌组织的实验研究

摘要：

目的：探讨血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导骨髓间充质干细胞（BMSCs）分化为心肌细胞的能力，及诱导后BMSCs体外联合脱细胞牛心包构建工程化组织心肌的可行性。方法分离培养大鼠BMSCs，用含0.1μmol/L AngⅡ的完全培养基诱导培养第3代BMSCs 24 h，然后换用完全培养基连续培养；对照组采用完全培养基连续培养。采用免疫荧光法检测诱导后的BMSCs表达心肌特异蛋白cTnT、β-MHC情况；透射电镜观察诱导后的细胞超微结构。用去污剂-酶消化法对新鲜牛心包行脱细胞处理，然后将诱导后4周的BMSCs接种于脱细胞牛心包生物支架上培养3 d后，对其进行观察检测。结果 AngⅡ诱导后的BMSCs向心肌细胞分化，可表达cTnT和β-MHC，对照组则不表达cTnT和β-MHC。电镜结果显示诱导后的细胞间可见类肌节组织及明显的桥粒连接；新鲜的牛心包经去污剂-酶联合四步法脱细胞处理及京尼平交联后，HE染色观察脱细胞的效率接近100%。扫描电镜观察发现脱细胞处理后的牛心包表面无细胞残留且表面排列杂乱，放大后可见有2μm小孔。观察体外构建的工程化心肌显示诱导后的BMSCs可良好地黏附于脱细胞牛心包生物支架表面并生长增殖，且少量可渗透到支架内部。结论 AngⅡ诱导的大鼠BMSCs可向心肌细胞方向分化，表达心肌特异蛋白cTnT和β-MHC。将其种植于脱细胞牛心包生物支架上，表面黏附良好，且可渗透到支架内部及血管周围，有望用于构建具有血管网络化的组织工程化心肌。

关键词：骨髓间充质干细胞、心肌细胞、组织工程、血管紧张素Ⅱ

分类号：R318;Q813(医用一般科学)

资助基金：山西省科技攻关项目20120313021-3；山西省留学归国人员科研项目2012091

在线出版日期：2015-08-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：133-137