EZH2基因RNAi慢病毒载体的包装及鉴定

摘要：

目的 外周T细胞淋巴瘤(PTCL)源于成熟的胸腺后淋巴细胞,是一类少见的生物学行为及临床表现均高度异质性的疾病,且预后差.包装zeste基因增强子同源物2(EZH2)RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,可为今后相关实验研究奠定基础.方法 靶向EZH2基因的短发夹RNA(EZH2-shRNA)质粒转化感受态细菌,筛选阳性克隆,经测序鉴定正确后通过脂质体将慢病毒三质粒系统共转染293T细胞,进行慢病毒包装.病毒载体感染Hut78细胞后,观察感染效率,并用反转录定量PCR(RT-qPCR)和Western Blot检测EZH2mRNA和蛋白表达水平.结果 成功包装了慢病毒表达载体,对Hut78细胞的感染效率在95％以上.RT-qPCR和Western Blot检测结果显示,EZH2基因在靶细胞中的表达水平降低.结论 成功包装并鉴定了EZH2基因RNAi慢病毒表达载体.

关键词：外周T细胞淋巴瘤、zeste基因增强子同源物2、慢病毒载体、RNA干扰

所属期刊栏目：37

分类号：R318;Q78(医用一般科学)

资助基金：国家自然科学基金81171899

在线出版日期：2014-10-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：210-213,232,后插4