MiR-199a对缺氧/复氧诱导的大鼠脑皮层神经元细胞活力及凋亡的影响

摘要：

目的:探讨miR-199a对缺氧/复氧诱导的大鼠脑皮层神经元细胞活力及凋亡的影响.方法:在体外培养大鼠脑皮层神经元细胞,采用缺氧/复氧的方式处理细胞建立细胞损伤模型并记作Model组;将正常培养的细胞作为对照(Con)组.分别将空载体、miR-199a mimic转染至大鼠脑皮层神经元细胞,建立缺氧/复氧细胞损伤模型,分别记作Model+NC组或Model+miR-199a mimic组.将miR-199a mimic转染至大鼠脑皮层神经元细胞后加入PI3K-AKT信号通路抑制剂LY294002处理,随后建立缺氧/复氧细胞损伤模型,记作Model+miR-199a mimic+LY294002组.采用反转录PCR法检测miR-199a的表达量,应用流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡率,采用MTT法检测细胞活力,采用蛋白质印迹法检测cleaved-caspase3、pro-caspase3、p-PI3K、p-AKT蛋白表达量.结果:与Con组比较,Model组miR-199a的表达水平、细胞活力、S期细胞比例及pro-caspase3、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平均显著降低,G0～G1期细胞比例、细胞凋亡率及cleaved-caspase3蛋白表达水平均显著提高,差异均有统计学意义(均P<0.001).与Model+NC组比较,Model+miR-199a mimic组细胞活力、S期细胞比例及pro-caspase3、p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平均显著提高,G0～G1期细胞比例、细胞凋亡率及cleaved-caspase3蛋白表达水平均显著降低,差异均有统计学意义(均P<0.001).与Model+miR-199a mimic组比较,Model+miR-199a mimic+LY294002组细胞活力、S期细胞比例及pro-caspase3蛋白表达水平均显著降低,G0～G1期细胞比例、细胞凋亡率及cleaved-caspase3蛋白表达水平均显著提高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论:MiR-199a过表达可改善缺氧/复氧诱导的大鼠脑皮层神经元细胞活力并抑制细胞凋亡,从而减轻细胞损伤;这些生物学效应可能是通过激活PI3K-AKT信号通路产生的.

关键词：miR-199a、缺氧/复氧、脑皮层神经元细胞、活力、凋亡、AKT、大鼠

所属期刊栏目：42

分类号：R739.8;R285.5;R573.32

资助基金：陕西省重点研发计划2017SF-181

在线出版日期：2022-06-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1028-1035