沉默E2F1对高糖诱导视网膜神经节细胞的保护作用

摘要：

目的:探讨E2F1对高糖诱导的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和凋亡的影响及其作用机制.方法:以RGC-5细胞为研究对象,构建高糖损伤模型,将RGC-5细胞转染后分为空白对照组、高糖组、高糖+si-E2F1组、高糖+si-con组、高糖+si-E2F1+PBS组、高糖+si-E2F1+SD19组.分别采用实时荧光定量PCR(real-time RT-PCR)与蛋白质印迹法检测细胞中E2F1 mRNA表达;四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞存活率,TUNEL法和流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡.蛋白质印迹法检测细胞中E2F1、磷酸化的转录激活子3(p-signal transducer and activator of transcription 3,p-STAT3)、STAT3、磷酸化的Janus蛋白酪氨酸激酶2(p-Janus kinase 2,p-JAK2)、JAK2、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved caspase-3)和活化的多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶(cleaved poly-ADP-ribose polymerase,cleaved PARP)蛋白表达.结果:与空白对照组相比,高糖组RGC-5细胞中E2F1表达水平升高,细胞存活率明显下降,p-STAT3、p-JAK2、cleaved caspase-3、cleaved PARP、E2F1表达及细胞凋亡率显著升高;沉默E2F1表达后,细胞存活率明显升高,而cleaved caspase-3蛋白和cleaved PARP蛋白表达及细胞凋亡率降低.SD19可部分逆转沉默E2F1对RGC-5细胞的保护作用.结论:抑制E2F1表达能够减轻高糖诱导的RGCs凋亡,其机制可能与抑制JAK2/STAT3信号通路有关.

关键词：视网膜神经节细胞、凋亡、转录因子E2F1、糖尿病

所属期刊栏目：42

资助基金：国家自然科学基金81373617

在线出版日期：2022-04-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：517-525