小鼠Wnt-1基因真核表达载体构建及其在大鼠成肌细胞中的表达

摘要：

目的:构建p-EGFP-C3-Wnt-1真核表达载体并转染体外培养大鼠成肌细胞,观察Wnt-1在其中的表达.方法:利用RT-PCR方法从小鼠胚脑中扩增获得Wnt-1基因编码区全长序列,克隆到含有增强型绿色荧光蛋白报告基因的真核表达载体p-EGFP-C3上,形成重组载体p-EGFP-C3-Wnt-1.大鼠成肌细胞原代培养及desmin免疫荧光染色鉴定.利用Lipofectamine TM2000脂质体将重组质粒p-EGFP-C3-Wnt-1转染成肌细胞.结果:重组质粒p-EGFP-C3-Wnt-1构建成功;将其转染成肌细胞72 h后,观察到EGFP报告基因和目的基因Wnt-1表达.结论:成功构建了小鼠胚脑Wnt-1基因的真核表达载体p-EGFP-C3-Wnt-1,并可转染成肌细胞.

关键词：Wnt-1、载体构建、成肌细胞、转染

所属期刊栏目：29

分类号：Q784;R541(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2009-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：196-201