丹酚酸 A 通过调节 Wnt/糖原合酶激酶3β/β－连环蛋白通路保护缺血性脑损伤大鼠

摘要：

目的：探讨丹酚酸 A（salvianolic acid A, SAA）对缺血性脑损伤大鼠的保护作用及其可能机制。方法54只成年雄性 Sprague－Daw ley 大鼠随机分为假手术组、脑缺血组和 SAA 组，每组18只。采用线栓法制作永久性大脑中动脉闭塞模型。 SAA 组在模型制作后0 h和6 h腹腔注射 SAA （3 mg/kg），其余各组注射等体积生理盐水。模型制作后24 h进行神经功能缺损评分，应用2,3,5－氯化二苯四氮唑染色检测脑梗死体积。采用 TUNEL 染色法检测细胞凋亡，免疫组化染色及蛋白质印迹法检测缺血皮质 Wnt3a、β－连环蛋白和磷酸化糖原合酶激酶3β（phospho－glycogen synthase kinase 3β, p－GSK－3β）表达。结果神经功能缺损评分显示，假手术组未见神经功能缺损（评分为0分），SAA 组神经功能缺损评分（中位数和四分位数间距）较脑缺血组显著降低[（3（2~3）分对4（3~5）分；Z =－2.679，P =0.007]。假手术组无梗死灶， SAA 组梗死体积较脑缺血组显著缩小[（79.038±10.665）mm3对（212.702±8.029）mm3；t =24.525，P <0.001]。假手术组仅见极少数阳性细胞，SAA组和脑缺血组 TUNEL 阳性细胞数量分别为（29.667±1.366）个/HP和（63.333±0.894）个/HP，前者显著少于后者（t =14.115，P <0.001）。免疫组化染色显示，假手术组、脑缺血组和 SAA 组 Wnt3a 阳性细胞数量分别为（35.500±2.572）个/HP、（18.056±3.765）个/HP和（29.000±2.376）个/HP，3组间存在显著性差异（F =115.972，P <0.001），而且 SAA 组显著多于脑缺血组（P <0.01）；假手术组、脑缺血组和 SAA 组 p－GSK－3β阳性细胞数量分别为（7.944±2.127）个/HP、（37.444±3.434）个/HP和（11.222±1.734）个/HP，3组间存在显著性差异（F =730.580，P <0.001），而且 SAA 组显著少于脑缺血组（ P <0.01）；假手术组、脑缺血组和 SAA 组β－连环蛋白阳性细胞数量分别为（26.722±26.722）个/HP、（16.556±1.854）个/HP 和（21.333±1.940）个/HP，3组间亦存在显著性差异（ F =33.385，P <0.01），而且 SAA 组显著多于脑缺血组（P <0.01）。蛋白质印迹分析显示，假手术组、脑缺血组和 SAA 组 Wnt3a 表达水平分别为1.000±0.190、0.800±0.185和1.198±0.262，3组间存在显著性差异（F =9.621，P <0.001），而且 SAA 组显著高于脑缺血组（P <0.01）；假手术组、脑缺血组和SAA 组 p－GSK－3β表达水平分别为0.650±0.150、1.290±0.250和1.190±0.250，3组间亦存在显著性差异（F =19.668，P <0.001），而且 SAA 组显著高于脑缺血组（P <0.01）；假手术组、脑缺血组和SAA 组β－连环蛋白表达水平分别为1.200±0.210、0.500±0.120和1.100±0.220，3组间存在显著性差异（F =33.385，P <0.001）（P <0.01），而且 SAA 组显著高于脑缺血组（P <0.01）。结论 SAA 对缺血脑损伤大鼠具有一定的保护作用，其机制可能与上调 Wnt3a 和β－连环蛋白表达以及下调 p－GSK－3β表达有关。

关键词：脑缺血、细胞凋亡、咖啡酸类、神经保护药、Wnt 蛋白质、糖原合酶激酶 3、β连环蛋白、信号转导、大鼠、丹酚酸 A

所属期刊栏目：24

分类号：R73;R78

资助基金：贵州省卫生计生委科学技术基金项目gzw jkj2014－2－157；珠海市重点学科项目珠卫2013070Fund programs Science and Technology Project of the Health and Family Planning Commission of Guizhou Province, Chinagzw jkj2014－2－157;Key Disciplines Project of Zhuhai, China2013070

在线出版日期：2016-05-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：168-173