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10.3760/cma.j.issn.1673-4165.2013.01.007

信号素3A诱导培养大鼠皮质神经元凋亡与PI3K/Akt通路有关

引用
目的 探讨外源性信号素3A(semaphorin 3A,Sema3A)对原代培养大鼠皮质神经元凋亡的影响和磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphoinositide-3-kinase,PI3K)/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(serine/threonine kinase,Akt)通路在Sema3A诱导凋亡中的作用.方法 体外培养新生Sprague-Dawley大鼠皮质神经元,并用微管相关蛋白-2免疫荧光染色鉴定.培养大鼠皮质神经元随机分为正常对照组和不同浓度Sema3A(500、1 000和2 000 μg/ml)组.CCK8法检测神经元存活率,Hoechst33342染色和TUNEL染色观察神经元凋亡,蛋白质印迹法检测P-Akt、Akt和Bcl-2表达.结果 培养的皮质神经元纯度达95%以上.CCK8检测显示,500、1 000、2 000 μg/ml Sema3A组细胞存活率分另为对照组的(80.9±5.3)%、(67.5±3.9)%和(50.2±4.4)%(F=165.042,P=0.000).Hoechst33342染色显示,正常对照组及500、1 000、2 000μg/ml Sema3A组神经元凋亡率分别为(22.4±1.2)%、(34.0±1.2)%、(39.3±1.4)%和(47.3 ±2.3)% (F=103.237,P=0.ooo).TUNEL染色显示,正常对照组及500、1 000、2 000 μg/ml Sema3A组神经元凋亡率分别为(23.9±1.1)%、(31.9±1.0)%、(40.1±1.5)%和(51.4±3.4)% (F=103.118,P=0.000).蛋白质印迹法显示,随着Sema3A浓度的增高,P-Akt(F=15.959,P=0.001)和Bcl-2(F=18.776,P=0.001)表达逐渐下调;而Akt表达无显著改变(F=0.590,P=0.639).结论 Sema3A主要通过诱导神经元凋亡而降低培养皮质神经元存活率,其机制可能与下调P-Akt和Bcl-2表达有关.

神经元、细胞凋亡、信号素3A、磷脂酰肌醇3-激酶类、原癌基因蛋白质c-akt、原癌基因蛋白质c-bcl-2、细胞、培养的、大鼠

21

R734.2;S814.3;R318

广东省自然科学基金;广东省科技计划

2013-05-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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1673-4165

11-5541/R

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