自体骨髓来源内皮祖细胞移植改善脑缺血再灌注大鼠神经功能转归

摘要：

目的 探讨目体骨髓米源内皮祖细肥(endothehalprogenitor cell,EPC)移植对脑缺血大鼠神经功能转归的影响及其可能机制.方法 体外分离培养自体骨髓来源EPC并用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(5 -bromodeoxyuridine,BrdU)标记.线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral arteryocclusion,MCAO)模型.EPC组大鼠经颈外静脉移植自体EPC[ 106/ml·kg)],对照组注射磷酸盐缓冲液(1 ml/kg),假手术组不进行任何处理(n=15).改良神经功能缺损严重程度评分(modifiedneurological severity score,mNSS)观察大鼠神经功能变化情况.BrdU免疫组化染色评价EPC增殖和分化.三维共聚焦图像分析检测脑缺血区血管结构和密度.TUNEL染色检测缺血脑组织凋亡细胞.酶联免疫吸附法检测血浆血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)浓度.结果 EPC组mNSS评分显著低于对照组[第8天时；(6.43±0.69)分对(8.86±0.95)分；q=2.673,P=0.035；第14天时:(4.55±0.89)分对(6.73±1.06)分；q=5.360,P=0.035].EPC组BrdU阳性细胞数量显著多于对照组[(42.2±5.76)对(25.67±5.49)；q=4.020,P=0.030].EPC组毛细血管直径显著小于对照组[(4.51±0.21)μm对(6.34±0.24) μm;q=3.980,P =0.003]；血管密度[(212.64±8.02)/0.002 mm3对(153.60±7.21 )/0.002 mn3；q =9.670,P=0.001]和微血管总表面积[(92 013±5 132)μm3/0.002 mm3对(71 366±4 538) μm2/0.002 mm3；q=4.180,P=0.014]显著高于和大于对照组；EPC组凋亡细胞数量显著少于对照组[(36.26±6.91)对(78.34±7.21)；t=-4.834,P=0.003]；EPC组血浆VEGF浓度显著高于对照组[(54.91±5.71)pg/ml对(13.81±4.25)pg/ml;q=12.300,P=0.002].结论 自体EPC移植对大鼠缺血脑组织具有保护作用,可能与VEGF相关联的血管再生和神经保护有关,其在治疗缺血性脑血管病中具有重要的应用前景.

关键词：脑缺血、干细胞、内皮、血管、细胞移植、新生血管化、生理性、血管内皮生长因子、细胞凋亡、疾病模型、动物、大鼠

所属期刊栏目：20

分类号：R743(神经病学与精神病学)

资助基金：国家自然科学基金30470601

在线出版日期：2012-07-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：257-262