10.3760/cma.j.issn.1673-4157.2015.04.006
人源性促甲状腺激素受体抗体Fab段抗体库的构建
目的 通过噬菌体表面展示技术,构建人源性促甲状腺激素受体抗体(TRAb)Fab片段抗体库.方法 从甲状腺功能亢进症患者外周血单个核细胞抽提总RNA,PCR法扩增免疫球蛋白分子轻链K、λ基因及重链Fd基因.构建轻链文库及组合文库.一个随机的组合文库在噬菌体表面表达.结果 从外周血单个核细胞中抽提得到总RNA,并反转录获得cDNA文库.PCR法扩增了大小约为680 bp的轻链K、λ基因及重链Fd基因,并构建了库容为1.32×105基因抗体库(轻链库)和库容为2.28×105 Fab抗体库(组合文库).Fab组合文库转化到大肠杆菌XL1-Blue感受态细胞,在辅助噬菌体M13K07的辅助下,扩增得到噬菌体抗体库.结论 噬菌体表面展示技术可成功构建人源性TRAb Fab片段组合文库.
噬菌体表面展示技术、人源性单克隆抗体、促甲状腺激素受体抗体Fab
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R392.11;R532.230.4;R655.7
天津市卫生局科技重点项目2013KR04
2015-08-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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