10.3760/cma.j.issn.1673-4378.2019.05.003
蛋白质转导4型-铜锌超氧化物歧化酶融合蛋白对大鼠脑缺血/再灌注损伤保护作用的研究
目的 探讨蛋白质转导4型-铜锌超氧化物歧化酶融合蛋白(protein transduction domain 4-Cu,Zn superoxide dismutase fusion protein, PTD4-Cu,Zn-SOD)对大鼠脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury, CI/RI)的保护作用.方法 按完全随机法将120只SD大鼠分为4组(每组30只):假手术组(SH组)、缺血/再灌注组(I/R组)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)组、PTD4-Cu,Zn-SOD组(PTD4-SOD组). I/R组、SOD组和PTD4-SOD组在烧灼凝断双侧椎动脉24 h后夹闭双侧颈总动脉,6 min后重新开放,制作CI/RI模型. SOD组与PTD4-SOD组于再灌注即刻分别经尾静脉注射SOD 6 mg/kg及PTD4-SOD 6 mg/kg,SH组及I/R组分别经尾静脉注射等容积PBS液.各组于再灌注2、6、12、24、72 h时各取6只断头取脑组织. H-E染色观察大鼠脑海马组织病理改变,黄嘌呤氧化酶法检测大鼠脑海马组织SOD活性,流式细胞仪检测海马细胞凋亡率. 结果 H-E染色结果:SH组海马CA1区神经细胞排列整齐、紧密,胞质淡红,胞核蓝染,核仁清晰;I/R组海马CA1区神经细胞排列紊乱,异常细胞数量增多,胞质、胞核固缩明显,核仁消失,核碎裂,溶解;PTD4-SOD组与I/R组比较海马CA1区神经细胞排列较整齐,异常细胞散在分布,数量较少;SOD组改变介于PTD4-SOD组和I/R组之间.SOD活性检测结果:与SH组比较,I/R组、SOD组各时点,PTD4-SOD组再灌注12、24、72 h,差异有统计学意义(P<0.05). SOD组与I/R组各时点比较,差异无统计学意义(P>0.05);PTD4-SOD组与I/R组及SOD组各时点比较,差异有统计学意义(P<0.05).海马细胞凋亡率结果:与SH组比较,I/R组、SOD组、PTD4-SOD组各时点凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);SOD组与I/R组各时点比较,差异无统计学意义(P>0.05);PTD4-SOD组与I/R组及SOD组各时点比较,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 PTD4-Cu,Zn-SOD对CI/RI具有保护作用,其机制可能与其通过提高脑内SOD活性有效清除自由基有关.
缺血再灌注损伤、自由基、蛋白质转导超氧化物歧化酶融合蛋白
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国家自然科学基金81071070 Fund program: National Natural Science Foundation of China 81071070
2019-07-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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