内皮细胞表面主要组织相容性复合-Ⅰ类相关链A分子介导的NK细胞对其细胞毒作用的实验研究

摘要：

目的观察内皮细胞表面主要组织相容性复合体-Ⅰ类相关链A(MICA)分子在NK细胞对其杀伤过程中的作用,并探讨其可能的机制.方法用10 ng/ml MICA重组抗原对实验组人脐静脉内皮细胞(HUVEC)进行诱导培养48 h,对照组加入等量磷酸盐缓冲液(PBS).用流式细胞仪(FCM)检测内皮细胞表面MICA分子的表达情况.使用免疫磁珠方法及CD56阳性分选试剂盒分选NK细胞,并将NK细胞与诱导培养后的HUVEC共同培养10 h.用荧光素进行染色,在荧光显微镜下观察死亡和存活HUVEC细胞数量,计算NK细胞对内皮细胞杀伤效率,用ELISA法测定细胞上清中的干扰素-γ(IFN-γ)和穿孔素水平.结果实验组HUVEC细胞表面MICA分子表达率为(32±5.6)%,对照组为(6.0±2.4)%.NK细胞对实验组HUVEC细胞的杀伤效率为(35.5±6.4)%,显著高于对照组的杀伤效率(12.6±3.2)%,(P=0.0087);实验组HUVEC细胞上清IFN-γ和穿孔素水平显著高于对照组,两组差异均有统计学意义(P=0.0025,P=0.0078).结论内皮细胞表面的MICA分子表达增加能够提高NK细胞对内皮细胞的杀伤效率;IFN-γ和穿孔素可能是发挥细胞毒作用的活性物质.

关键词：主要组织相容性复合体-Ⅰ类相关链A、NK细胞、NKG2D受体、细胞毒作用

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分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30872530;江苏省自然科学基金资助项目BK2007056;江苏省卫生厅重点人才资助项目RC2007079

在线出版日期：2011-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：69-72