10.3760/cma.j.cn431460-20201225-00225
miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响
目的:探讨miR-138-5p靶向HIF-1α对人肾癌细胞GRC-1增殖、凋亡和迁移的影响。方法:将GRC-1细胞分为四组,分别为GRC-1组、miR-138 mimic组、pc-HIF-1α组及共转染组(mimic+pc-HIF-1α组),并将mimic-scramble组设置为miR-138 mimic转染的阴性对照组。采用荧光素酶报告实验验证miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系,采用qRT-PCR检测miR-138 mimic对GRC-1细胞HIF-1α mRNA水平的影响,采用Western blot检测miR-138对GRC-1细胞HIF-1α蛋白水平的影响。分别采用CCK-8、流式细胞术和划痕实验检测miR-138-5p靶向HIF-1α对GRC-1细胞的增殖、凋亡和迁移的影响。结果:荧光素酶报告实验结果显示miR-138-5p可靶向HIF-1α。与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的miR-138-5p mRNA表达水平较高,HIF-1α mRNA表达水平较低(均
P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的HIF-1α蛋白表达水平较低,而pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平较高(均
P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的HIF-1α蛋白表达水平低于pc-HIF-1α组(
P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞增殖倍数较低,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数较高(均
P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞增殖倍数低于pc-HIF-1α组,差异有统计学意义(
P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞凋亡率较高,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率较低(均
P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞凋亡率高于pc-HIF-1α组(
P<0.01);与GRC-1组比较,miR-138 mimic组的GRC-1细胞划痕愈合率较低,而pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率较高(均
P<0.01);mimic+pc-HIF-1α组的GRC-1细胞划痕愈合率低于pc-HIF-1α组(
P<0.01)。
结论:miR-138-5p可通过靶向HIF-1α,负向调控HIF-1α mRNA和蛋白的表达,进而减弱人肾癌细胞GRC-1的增殖和迁移,促进其凋亡。
肾肿瘤、缺氧诱导因子-1α、微小RNA-138-5p、细胞凋亡、细胞运动
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2022-09-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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