用超速玻璃化冻存的人肝组织微团构建人工肝生物反应器的功能研究

摘要：

目的 探讨用超速玻璃化法冻存的人肝组织(细胞)微团构建人工肝生物反应器的代谢和合成功能.方法 将手术来源的人肝组织用胶原酶做有限消化,分解成肝组织微团,将肝组织微团用超速玻璃化法冻存,复苏后再用胶原酶有限消化成更小的肝细胞微团.将肝细胞微团与胶原溶液(pH 7.4)混合,并将混合物注入中空纤维反应器管外腔,使混合物在管外腔形成胶原凝胶将肝细胞微团固定其中,构成生物反应器.用利多卡因循环灌注反应器管内腔24 h,检验反应器的药物代谢功能;用乙型肝炎患者血浆循环灌注反应器管内腔6.5 h,检测灌注液中血氨、间接胆红素(IBIL)、凝血酶原时间(PT)的变化,检验反应器的肝细胞功能.结果 人肝组织微团经超速玻璃化冻存7d后复苏的肝细胞活率为(81.9±4.2)％.用利多卡因灌注24 h后,利多卡因浓度为6.2 mg/L,代谢转换率为92％.100 mL患者血浆循环灌注生物反应器6.5 h后,灌注液中血氨、IBIL和PT值分别为(22.5±6.1) μmol/L、(29.3±8.6) μmol/L和(20.5±2.7)s,低于灌注0.5 h的相应值,差异均有统计学意义(t=13.5、17.9和7.4,P均＜0.05).结论 超速玻璃化法冻存的人肝组织(细胞)微团复苏后固定于胶原凝胶中构建的中空纤维型人工肝生物反应器,有较好的肝细胞代谢和合成功能.

关键词：肝、人工、生物反应器、肝组织、冻存

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分类号：R394.2;R656.2;R512.62

资助基金：福州市科技局科研项目2013-S-125-6

在线出版日期：2015-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：295-299