强制泛素化HBcAg融合基因重组慢病毒对小鼠体内细胞毒性T细胞的诱导作用

摘要：

目的 观察强制泛素化HBcAg (Ub-HBcAg)融合基因重组慢病毒(Lv)对小鼠体内细胞毒性T细胞(CTL)的诱导作用.方法 包装重组LV、Ub及HBcAg基因分别获得LV-HBcAg及LV-Ub-HBcAg融合基因；选取Balb/c小鼠32只,分为磷酸盐缓冲液组(PBS组,4只,200 μL PBS)、LV组(4只,200μLPBS和2×107拷贝LV的混悬液)、慢病毒HBcAg融合基因组(LV-HBcAg组,12只,200μLPBS和2× 107拷贝LV-HBcAg的混悬液)、慢病毒Ub-HBcAg融合基因组(LV-Ub-HBcAg组,12只,200μLPBS和2× 107拷贝LV-Ub-HBcAg 的混悬液),所有组别的小鼠均采用尾根部皮内注射.免疫后提取小鼠T细胞,流式细胞术双标法检测胞内IFN-γ水平,ELISA法检测T细胞培养液上清中IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10的分泌水平,CCK-8试剂盒检测T细胞增殖反应.结果 LV-Ub-HBcAg组诱导的CIL数量高于LV-HBcAg组(t=2.30,P＜0.05)；LV-Ub-HBcAg 组T细胞的增殖反应强于LV-HBcAg组(t=2.25,P＜0.05)；免疫后LV-Ub-HBcAg组分泌的IFN-γ(44.57±2.91 pg/mL)和IL-2(152.77±12.39 pg/mL)高于LV-HBcAg组分泌的IFN-γ (37.23±0.84 pg/mL)和IL-2(101.24±5.09 pg/mL),差异均有统计学意义(t=2.12、2.66,P＜0.05),LV-Ub-HBcAg组和LV-HBcAg组细胞因子IL-4和IL10分泌差异无统计学意义(t=0.83、1.00,P＞0.05).结论 LV-Ub-HBcAg能够有效刺激T细胞增殖、活化,促进Th1型细胞因子IFN-γ和IL-2的分泌.抗原强制泛素化能够促进抗原蛋白的有效提呈,诱导更高水平的免疫应答.

关键词：肝炎核心抗原、乙型、CTL、慢病毒载体、泛素

所属期刊栏目：40

分类号：R394.2;R733.71;S852.4

资助基金：国家自然科学基金;上海市科研项目

在线出版日期：2013-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：217-221,封3