10.3760/cma.j.issn.1673-4149.2006.01.005
戊型肝炎病毒结构蛋白基因的真核表达
目的使用酵母表达系统表达戊型肝炎病毒结构蛋白基因.方法构建含戊型肝炎病毒(HEV)结构蛋白嵌合基因HEV ORF23(由HEV ORF2 C端800bp片段与ORF3全基因组成)的重组表达质粒pPICZ α A-HEV ORF23,并通过电转移的方法将该基因整合入甲醇营养型酵母的基因组DNA中,利用甲醇进行诱导表达,表达产物经纯化后,进行Western印迹鉴定.结果pH6.0环境下诱导培养72h后,在细胞沉淀中获得一个分子量大约为69kDa的可溶性目的蛋白,纯化蛋白经Western印迹检测后发现能与戊型肝炎患者血清发生较强的特异性免疫反应.结论采用酵母表达系统诱导表达可以获得抗原性较强的HEV重组表达抗原,为进一步开发研制有效的诊断抗原和疫苗奠定了基础.
戊型肝炎病毒、嵌合基因、酵母表达系统、重组表达蛋白
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R5(内科学)
浙江省自然科学基金RC01054;浙江省科技厅院所重大项目2003F11023
2006-04-13(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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