环介导等温扩增技术检测蓝氏贾第鞭毛虫

摘要：

目的 建立应用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测蓝氏贾第鞭毛虫的方法. 方法 体外培养蓝氏贾第鞭毛虫滋养体,提取DNA.根据GenBank显示的贾第虫序列及环介导等温扩增技术的原理,设计4条贾第虫特异引物,利用LAMP检测蓝氏贾第鞭毛虫DNA,以隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA为对照,并将不含病原体DNA的纯水作为阴性对照.LAMP产物经SYBR green I显色后观察结果,绿色为阳性,棕色为阴性;对LAMP产物进行琼脂糖凝胶电泳分析,观察其特征条带的情况. 结果 蓝氏贾第鞭毛虫DNA检测管经显色后呈绿色,隐孢子虫卵囊DNA、疟原虫DNA及水阴性对照管呈棕色.含有蓝氏贾第鞭毛虫DNA的LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带,安氏隐孢子虫DNA、恶性疟原虫DNA及阴性对照水无扩增产物. 结论 成功建立了检测蓝氏贾第鞭毛虫的LAMP方法.

关键词：环介导等温扩增法、蓝氏贾第鞭毛虫、安氏隐孢子虫

所属期刊栏目：37

分类号：R5(内科学)

资助基金：国家卫生行业科研专项200802012;国家传染病重大专项2009ZX10004-201;2008ZX10004-002

在线出版日期：2010-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：145-147