hsa_circRNA_0001478在COPD相关肺动脉高压患者中的表达及其对人肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

摘要：

目的:基于基因组高通量测序技术筛选慢性阻塞性肺疾病(COPD)相关肺动脉高压患者血液中异常表达的环状非编码RNAs(circRNAs)，并研究显著差异表达的hsa_circRNA_0001478对人肺动脉平滑肌细胞(hPASMCs)增殖及凋亡的影响。方法:本研究为实验研究。采用非随机抽样法选取2021年1月至12月在宁夏回族自治区人民医院呼吸内科住院的COPD肺动脉高压期患者、单纯COPD患者及健康人群的血液标本，采用RNA测序进行测序分析，并运用荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)验证外周血标本中超过10倍差异表达基因。通过RT-PCR验证hPASMCs中hsa_circRNA_0001478被敲低后的表达水平；运用细胞计数试剂盒实验检测细胞的增殖功能；Hoechst 33342实验通过对细胞核染色确定细胞的状态以检测细胞凋亡；Transwell实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果:根据测序结果，挑选出在COPD合并肺动脉高压患者外周血中明显高表达的4种circRNAs：hsa_circRNA_0001478、hsa_circRNA_0006872、hsa_circRNA_0001859和hsa_circRNA_0016070，构建相对应的引物，并通过RT-PCR在COPD合并肺动脉高压患者进行验证，发现仅hsa_circRNA_0001478表达差异较为明显。构建的si-circ质粒可显著降低hsa_circRNA_0001478在hPASMCs中的表达，转染si-circ的细胞增殖、迁移及侵袭能力均降低，并促进细胞凋亡。结论:hsa_circRNA_0001478的异常表达对hPASMCs的细胞增殖和细胞凋亡均有影响，这些结果表明hsa_circRNA_0001478在COPD合并肺动脉高压的发生、发展中可能发挥重要的作用。

关键词：肺疾病，慢性阻塞性、RNA，环状、肺动脉高压、细胞增殖、细胞凋亡、Hsa_circRNA_0001478、人肺动脉平滑肌细胞

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资助基金：国家自然科学基金82160017;江苏省自然科学基金BK20201183;江苏省"双创人才"JSSCRC2021568;宁夏自然科学基金2022AAC03351;National Natural Science Foundation of China82160017;Natural Science Foundation of Jiangsu ProvinceBK20201183;The " Innovative and Entrepreneurial Talent" in Jiangsu ProvinceJSSCRC2021568;Natural Science Foundation of Ningxia2022AAC03351

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：425-433