10.3760/cma.j.issn.1673-436X.2007.15.003
流感病毒A单抗杂交瘤细胞cDNA文库的构建
目的 应用SuperSciptTMⅡ RnaseH- Reverse Transcriptase 建库试剂盒建立了流感病毒A单抗杂交瘤细胞cDNA文库.方法 取流感病毒A单抗杂交瘤细胞,进行体外培养,提取mRNA,并将其反转录成cDNA,与EcoRI接头连接后插入pBluescriptⅡ SK(+)XR载体,体外包装后转染到DH10B宿主菌中,进行滴度测试及文库扩增.结果 构建的流感病毒A单抗杂交瘤细胞cDNA 文库含1.07×106重组子,重组率87.5%,插入片段长度约为500~2000 bp.扩增后的文库浓度为3.2×107重组子/μl,将文库稀释到10-6时所产生的噬菌斑密度最为适宜.结论 试验结果表明,该库符合标准,所构建的流感病毒A单抗杂交瘤细胞cDNA 文库为进一步筛选目的 基因、制作基因芯片等提供了有效的工具.
cDNA文库、构建、流感病毒、杂交瘤细胞
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R73(肿瘤学)
军队科技攻关项目资助项目06G026
2007-09-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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