HIF-1α促进恶性脑膜瘤血管发生的分子机制

摘要：

目的 探讨HIF-1α在恶性脑膜瘤血管发生中的关键作用机制.方法 qPCR法和免疫组织化学法测定正常胎盘组织和良性(WHOⅠ级)至复发性(WHOⅡ～Ⅲ级)脑膜瘤组织中HIF-1α和IGF1R的mRNA和蛋白质表达水平.双荧光素酶报告基因分析和ChIP实验证明HIF-1α与IGF1 基因调控区的直接作用关系.采用shRNA敲低间变性脑膜瘤 CRL-3370 细胞中 HIF-1α 的表达.ELISA 法测定敲低 HIF-1α 后CRL-3370 细胞分泌IGF1 和VEGF的水平变化.蛋白免疫印迹法测定细胞中p-IGF1Rβ、IGF1Rβ和VEGFR2的表达水平变化.建立CRL-3370 细胞与HUVEC2 的共培养体系,通过缺氧培养诱导CRL-3370 细胞中HIF-1α表达并随后进行shRNA敲低.CCK-8 法测定共培养体系中HUVEC2 的细胞增殖能力;qPCR法测定其胞内VEGF、ANGP1 和MMP2 mRNA的表达水平;划痕实验和Transwell细胞侵袭实验测定细胞迁移和侵袭能力.结果 随着脑膜瘤由良性(WHOⅠ级)至复发性(WHOⅡ～Ⅲ级)进展,脑膜瘤组织中HIF-1α和IGF1R的mRNA和蛋白质表达水平增强(P<0.01).与对照组相比,IGF1 组的荧光素酶活性明显上调;与IGF1 组相比,删除位点 4 组的荧光素酶活性被明显抑制(P<0.05).ChIP 实验结果显示,HIF-1α 组IGF1site-4 的DNA含量明显高于其对应IgG组的DNA含量(P<0.05).与shRNA NT组相比,HIF-1α shR-NA组CRL-3370 细胞分泌IGF1 和VEGF的水平明显降低;胞内p-IGF1Rβ、IGF1Rβ和VEGFR2 的表达水平明显降低.共培养体系中HUVEC2 的增殖能力明显降低;其胞内VEGF、ANGP1、MMP2 mRNA表达水平明显降低;细胞迁移和侵袭能力明显降低(P<0.05).结论 复发性脑膜瘤上调 HIF-1α直接作用并增强IGF1/IGF1R轴促进HUVEC2 的血管发生和肿瘤恶性进展.

关键词：脑膜瘤、HIF-1α、IGF1/IGF1R轴、血管发生

所属期刊栏目：20

分类号：R739.9(肿瘤学)

在线出版日期：2023-10-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：390-396