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10.3870/j.issn.1672-8009.2020.02.003

miR-140-3 p靶向CXCR4抑制视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖和上皮间质转化

引用
目的 探索微小RNA-140-3p(miR-140-3p)靶向趋化因子受体4(chemokine CXC motif receptor 4,CXCR4)对视网膜母细胞瘤Y79细胞增殖和上皮间质转化的影响.方法 检测正常视网膜组织和视网膜母细胞瘤组织中miR-140-3p和CXCR4的mRNA表达水平;在Y78细胞中转染miR-140-3p mimcs和mimcs NC,检测miR-140-3p和CXCR4的mRNA表达水平;利用生物信息学软件和双荧光素酶试验验证miR-140-3p对CXCR4的靶向关系;检测各组细胞的增殖、凋亡及侵袭情况,Western印迹检测细胞中CXCR4、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、N-cadherin、E-cad-herin、 基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP-2)、MMP-9蛋白水平.结果 视网膜母细胞瘤组织中miR-140-3p的表达水平显著低于正常视网膜组织(P<0.01),CXCR4的表达水平显著高于正常视网膜组织(P<0.01),且miR-140-3p与CXCR4呈负相关性(r=-0.638,P=0.0035);miR-140-3p mimcs组细胞中的miR-140-3p表达量显著高于Control组(P<0.01),CXCR4的表达量显著低于Control组(P<0.01);靶基因预测软件发现CXCR4可能是miR-140-3p的靶基因,双荧光素酶实验结果进一步证实了CX-CR4是miR-140-3p的直接靶点;过表达miR-140-3p后,Y79细胞增殖率和侵袭率降低,凋亡率升高,差异均达到显著水平(P<0.01);Western印迹结果显示,过表达miR-140-3p后,CXCR4、PCNA、N-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达显著降低,clcaspase-3、E-cadherin蛋白表达显升高,差异均达到显著水平(P<0.01).结论 miR-140-3p靶向抑制CXCR4调控细胞增殖、 凋亡及EMT相关蛋白表达,抑制视网膜母细胞瘤Y79细胞的增殖和上皮间质转化.

视网膜母细胞瘤、微小RNA-140-3p、趋化因子受体4、细胞增殖、上皮间质转化

17

R246.82(中医临床学)

沈阳市自然科学基金No. 171092

2020-07-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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1672-8009

42-1720/R

17

2020,17(2)

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