乳酸调节巨噬细胞向M2型极化的作用

摘要：

目的 探讨乳酸对巨噬细胞极化作用的影响,以及PI3K/Akt信号通路在上述过程中的作用.方法 体外培养小鼠单核巨噬细胞株RAW264.7,分为阴性对照组和实验组(乳酸干预浓度分别为1、10、100μmol/L),培养24 h后,RT-PCR方法检测各组细胞Arg1、CD206、NOS2基因mRNA表达水平的变化,Western印迹方法检测各组细胞Arg1、CD206、NOS2、PI3K、Akt蛋白表达水平的变化.ELISA法检测各组细胞因子的表达.结果 乳酸诱导RAW264.7细胞内M2型巨噬细胞标志分子Arg1、CD206表达上调,M1型巨噬细胞标志分子NOS2表达下调,此作用且呈浓度依赖性.RT-PCR结果显示,与阴性对照组相比,100μmol/L乳酸对Arg1、CD206基因mRNA上调作用最为明显,分别增加了2.37倍(t=7.901,P<0.05)和3.21倍(t=11.225,P<0.05).100μmol/L乳酸对NOS2基因mRNA下调作用最为明显,其表达下降了(76.35±4.21)％(t=13.475,P<0.05).Western印迹结果显示,100μmol/L乳酸对Arg1、CD206蛋白表达水平上调作用最为明显,分别增加了2.69倍(t=8.922,P<0.05)和3.77倍(t=10.737,P<0.05).100μmol/L乳酸对NOS2蛋白表达水平下调作用最为明显,其表达下降了(80.12±5.21)％(t=9.563,P<0.05).ELISA结果显示,乳酸诱导培养上清液中M1型细胞因子TNF-α、IFN-γ和IL-1α表达下调,M2型细胞因子IL-10和IL-4表达上调.Western印迹结果显示PI3K、Akt基因蛋白表达水平下调,且呈浓度依赖性.与阴性对照组相比,100μmol/L乳酸对PI3K、Akt基因蛋白表达水平下调最为明显,分别下降了(83.63±3.75)％(t=12.256,P<0.05)和(75.17±4.32)％(t=10.261,P<0.05).结论 乳酸能诱导巨噬细胞极化为M2型,机制可能包括PI3K/Akt信号通路参与.

关键词：乳酸、巨噬细胞、极化、PI3K/Akt信号通路

所属期刊栏目：15

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：湖北省自然科学基金2014CFB395;a grant from the Natural Science Foundation of Hubei Province2014CFB395

在线出版日期：2018-07-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：136-139