10.3870/j.issn.1672-8009.2016.05.008
人星状病毒非结构蛋白nsP1 a/1相互作用的宿主细胞靶蛋白筛选
目的:利用细菌双杂交技术筛选与人星状病毒非结构蛋白nsP1a/1相互作用的蛋白。方法培养人肠道细胞HT29,提取基因组,利用细菌双杂交系统载体pUT18 C构建HT29基因组文库,同时构建诱饵载体nsP1a/1?pKT25。将文库和诱饵载体共转化进入细菌BTH101,在M63培养基上进行筛选。结果通过酶切鉴定以及测序分析,诱饵载体构建正确,并且利用细菌双杂交技术成功从HT29细胞基因组文库中筛选出能与人星状病毒非结构蛋白 nsP1a/1相互作用的蛋白。结论成功构建了人星状病毒非结构蛋白nsP1a/1的诱饵载体,在HT29细胞基因组文库中筛选得到了3个与nsP1a/1相互作用的蛋白,为进一步研究人星状病毒在细胞内的增殖和防治药物的应用奠定基础。
细菌双杂交、人星状病毒、nsP1a/1、HT29细胞、筛选
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R373(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
昆明理工大学分析测试基金No.20150997This work was supported by a grant from the Foundation for Analysis and Measurementof Kunming University of Science and Technology 20150997
2016-10-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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