10.3870/j.issn.1672-8009.2013.06.003
miR-29b对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞增殖与凋亡的影响
目的 探索过表达miR-29b对TNF-α诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)增殖与凋亡的影响及初步作用机制.方法 MTT法筛选TNF-α诱导HUVECs的最佳浓度和时间,建立细胞凋亡模型;MTT法筛选miR-29b mimic转染HUVECs的最佳转染时间和浓度;MTT法检测过表达miR-29b对TNF-α诱导HUVECs增殖活力的影响;Hoechst 33342荧光染色检测过表达miR-29b对TNF-α诱导HUVECs凋亡的影响;Western印迹技术检测过表达miR-29b对Akt磷酸化水平、Bcl-2 蛋白表达的影响.结果 TNF-α诱导的HUVECs凋亡的最佳浓度为10 ng/ml,最佳时间是48 h;miR-29b mimics转染HUVECs的最佳浓度为50 nmol/L,最佳作用时间是48 h;过表达miR-29b能显著降低TNF-α诱导的HUVECs的增殖活力(P<0.001);Heochst33342荧光染色结果显示,miR-29b过表达能促进TNF-α诱导的HUVECs的凋亡(P<0.05);过表达miR-29b 能显著下调Akt磷酸化(p-Akt)与Bcl-2蛋白的表达(P<0.001).结论 过表达miR-29b可降低TNF-α诱导的HUVECs的增殖活力并促进其凋亡,其机制可能与下调Akt磷酸化、Bcl-2 蛋白的表达相关.
miR-29b、人脐静脉内皮细胞、TNF-α、增殖、凋亡
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R363(病理学)
湖南省自然科学基金06JJ30016;湖南省教育厅青年项目09B090;衡阳市科技局项目2009KJ09
2014-02-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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