NeuroD腺病毒载体的构建以及在小鼠胰岛β细胞中的过表达

摘要：

目的 构建小鼠NeuroD重组腺病毒载体及相应的对照病毒载体,并验证NeuroD基因在小鼠胰岛中的表达活性.方法 设计合成一对小鼠NeuroD的cds区的引物序列,以小鼠胰岛cDNA为模板PCR扩增目的 片段,凝胶电泳回收DNA片段,经双酶切,将目的 片段克隆至AdTrack-CMV穿梭质粒上,并用腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183细菌中进行同源重组,挑选阳性克隆小提质粒转染293A细胞,经包装得到pAd-NeuroD和pAd-CMV重组腺病毒,感染小鼠胰岛,Western 印迹法检测胰岛内NeuroD蛋白表达水平.结果经验证构建成功带有NeuroD基因的腺病毒载体,能在小鼠胰岛中稳定过量表达.结论 成功构建了小鼠胰岛β细胞来源的NeuroD腺病毒载体,为进一步研究NeuroD基因在胰岛β细胞中功能奠定了基础.

关键词：NeuroD、腺病毒载体、胰岛β细胞

所属期刊栏目：10

分类号：R394.3

在线出版日期：2013-07-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：69-72