重组真核质粒pEGFP-C2-hTudor-SN-SN(1~4)的构建及表达

摘要：

目的 将人类Tudor-SN(tudor staphylococcal nuclease)蛋白SN(1~4)基因片段分别定向连入pEGFP-C2质粒,使Tudor-SN蛋白SN各功能片段与绿色荧光蛋白在HeLa细胞内融合表达.方法 以重组质粒pSG5-Tudor-SN-flag为模板,PCR法扩增出目的 基因,利用EcoRⅠ和SalⅠ双酶切法将目的 片段连接到pEGFP-C2载体上,再将构建成功的pEGFP-C2- Tudor-SN-SN (1~4)重组质粒转染入HeLa细胞内,以荧光显微镜及Western印迹法检测绿色荧光蛋白与目的 蛋白的融合表达情况.结果 以单/双酶切及基因测序法鉴定构建的重组质粒均无误,荧光显微镜及Western印迹结果均检测到绿色融合蛋白的表达.结论重组pEGFP-C2- hTudor-SN-SN (1~4)质粒成功构建并表达.

关键词：人类Tudor-SN蛋白、pEGFP-C2、重组质粒、融合蛋白

所属期刊栏目：9

分类号：Q7(分子生物学)

资助基金：国家杰出青年基金项目31125012;国家高技术研究发展计划资助项目863计划2007AA02Zll5;国家自然科学基金30970582,31100967,31170830;国家自然科学重大研究计划培育项目90919032;国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金20091202110001;中国博士后科学基金2011M500529;天津市教委重点项目2008ZD01

在线出版日期：2013-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：241-245