10.3870/j.issn.1672-8009.2011.04.006
grp78真核表达载体构建及其稳定转染HeLa细胞系建立
目的 构建人grp78基因真核表达载体,并建立稳定高表达grp78的人宫颈癌HeLa细胞系.方法 用RT-PCR方法从人宫颈癌HeLa细胞中扩增grp78基因编码区,将PCR产物克隆到pcDNA3.1(+)真核表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)/grp78并测序鉴定.用构建成功的pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体转染入人宫颈癌HeLa细胞,经G418筛选获得grp78稳定高表达的HeLa细胞系,并用RT-PCR及Western 印迹方法鉴定.结果 成功构建pcDNA3.1(+)/grp78真核表达载体,筛选获得稳定高表达人grp78的HeLa细胞系.结论 grp78真核表达载体的成功构建和稳定高表达grp78的HeLa细胞系的建立为进一步研究grp78的功能奠定了基础.
人grp78基因、载体构建、转染、基因表达
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R349.64(人体生物化学、分子生物学)
国家自然科学基金81001152,81071663,30901586
2011-11-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共4页
309-312