视黄酸核受体γ重组腺病毒构建及其鉴定

摘要：

目的 构建携带大鼠视黄酸核受体γ(retinoic acid receptor γ,RARγ)的重组腺病毒,为研究RARγ在骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化中的作用奠定基础.方法 体外扩增大鼠RARγ基因,将其定向克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrace-TOX构建重组质粒pAdTrace-RARγ,并在BJ5183菌中与骨架质粒pAdEasy-1重组获得腺病毒载体pAd-RARγ,PacⅠ酶切后转染HEK 293细胞包装腺病毒.腺病毒Ad-RARγ感染大鼠MSCs,Real-time PCR和Western印迹检测 RARγ的表达.结果 PCR,酶切及测序均证实RARγ正确克隆至腺病毒质粒载体中,Ad-RARγ对MSCs感染率达60 %~70 %,并明显增强RARγ基因和蛋白的表达.结论 成功构建携带RARγ的重组腺病毒,并具有上调大鼠MSCs RARγ基因和蛋白表达的功能.

关键词：视黄酸核受体γ、重组腺病毒、视黄酸信号转导通路、骨髓间充质干细胞

所属期刊栏目：8

分类号：Q782(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金30830106,30972461;重庆市自然科学基金CSTC,2010BB5097;中国博士后基金20100800667

在线出版日期：2011-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：283-288